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DNA 聚合酶的兩大分類
發(fā)布日期:
2018-03-23
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DNA 聚合酶作為聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)的重要因素之一,在PCR過程中起著至關(guān)重要的作用,在某種意義上甚至可以說,PCR技術(shù)就是耐熱DNA聚合酶的技術(shù)。故綜合研究聚合酶并改善其酶學(xué)性能,已成為分子生物學(xué)工作者關(guān)注的熱點之一。
目前發(fā)現(xiàn)的耐熱DNA聚合酶均屬于A群或B群。屬于A群的都來源于真細菌,如來源于棲熱屬的Taq、Tth、Tca、Tfl、Tfi以及來源于芽胞菌屬的Bst;屬于B群的耐熱DNA聚合酶均來源于古細菌,如來源于高溫球菌屬的Tli 、焦熱球菌屬的Pfu和KOD1 、硫葉菌屬的Sac和Sso等,大量來自B群的DNA聚合酶被稱為a-like DNA聚合酶,因為它們都具有一個保守的真核a-DNA聚合酶氨基酸序列,這些DNA聚合酶都已經(jīng)廣泛應(yīng)用于PCR技術(shù)中。
聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)是一種體外快速擴增特定DNA片段的技術(shù),是在由DNA模板、引物、dNTP ,適當(dāng)緩沖液等組成的反應(yīng)混合物中,由DNA聚合酶催化,對一對寡核普酸引物所界定的DNA片斷進行擴增的反應(yīng)。在此過程中,DNA聚合酶起著關(guān)鍵性作用,所以自PCR技術(shù)產(chǎn)生至今,人們一直在通過各種手努力尋找特異地催化單核普酸聚合的DNA聚合酶。